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TransEasy™超高效感受态细胞制备试剂盒



本试剂盒是在制备高效感受态细胞的标准方法上结合了一步法制备感受态细胞的方法,既可以一步制备超高效的感受态细胞,又可把常态细胞(包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4ºC放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等)快速制备成感受态细胞。

名称 描述 货号 价格(RMB) 说明书

TransEasy™超高效感受态细胞制备试剂盒

优化的感受态细胞制备试剂盒,转化效率高,操作方便。

U0201A

88

P53 instruction

U0201B 398
U0201C 1200


感受态制备方法比较

compare with competent preparation process

 

(a) (b)
实验例 涂板量(µl) 菌落数 转化率
无速冻 速冻后 无速冻 速冻后
A 100 68 1006 6.8×107 1.0×109
200 150 1500 7.5×107 7.5×108
B 100 96 809 9.6×107 8.1×108
200 178 2800 8.9×107 1.4×109
C 100 64 1850 6.4×107 1.9×109
200 130 3612 6.5×107 1.8×109
平均转化率 7.6×107 1.3×109

图. 使用本试剂盒按照一步超高效法大量制备E.coli DH5α感受态细胞,使用pUC19质粒10pg转化至E.coli DH5α感受态细胞中(同时用灭菌水代替质粒做空白对照实验),在含有Amp抗性的LB琼脂平板培养基上形成单菌落,计算菌落数及转化率。a. 涂板量为100µl的转化率统计图;b. 涂板量为100µl的菌落数统计图

几种常用的感受态细胞


DH5α

具有α-互补性,便于鉴别重组体菌株。该菌株可用于制作基因库、进行亚克隆等,由于该菌株同时具有deoR 变异,可以作为较大质粒的宿主菌使用。

Stbl3

常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选。该菌株是复制慢病毒载体系统推荐使用的菌株,对慢病毒载体等较大的质粒转化的效果好,有效减低错误重组的可能性。

Top10

一种用于培养质粒平板和粘粒平板的大肠杆菌菌株,可用于蓝白斑筛选。该菌株适用于DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

2T1

具有四环素抗性基因(TetR);自身的 ton A基因型能够阻止噬菌体T1和T5的感染;形成菌落时间较其他菌株快(约12小时),适合构建高质量的基因组文库。

BL21(DE3)

经过特殊改造的专门用来表达T7启动子启动基因的表达用大肠杆菌菌株。

产品名称 货号 价格
DH5α U0102A ¥200
Stbl3 U0103A ¥1000
Top10 U0106A ¥200
2T1 U0104A ¥200
BL21(DE3) U0105A ¥200

 

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