EZShuttle™ BP 重组克隆体系

 -Efficient cloning system based on phage lambda recombination, the same principle as Gateway® technology.

即将上市!

产品介绍

GeneCopoeia 提供的 EZShuttle™ 重组克隆体系应用 E.coli 和 λ 噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA 片段在载体间相互转换;其原理与 Gateway® 克隆技术相同。EZShuttle™ 重组克隆体系主要包含以下产品:

1. EZRecombinase™ Mixes:催化 attL x attR 和 attB x attP 重组反应。

2. pEZ™ 表达载体: 主要用于构建即用型表达克隆。

3. EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭克隆:GeneCopeia 提供约 35,000 种人和小鼠的 EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭      克隆。

EZShuttle™ 重组克隆体系与 Gateway® 克隆技术完全兼容,如表1所示。

 

表1. GeneCopoeia's EZShuttle™ 重组克隆体系与 Gateway® 克隆技术完全兼容。

产品优势

•   由重组酶、表达载体和已验证 ORF 序列的穿梭克隆组成的一个完整的重组克隆体系;

•   EZRecombinase™ LR Mix 和 EZRecombinase™ BP Mix 的活性高;

•  提供带有不同筛选标记和标签的 pEZ™ 表达载体,这些载体可用于基因克隆、基因编辑、蛋白质纯化和基因功能     分析;

 

产品应用

•   构建即用型表达克隆:使穿梭克隆或其它 DNA 片段插入到表达载体。

•   蛋白质纯化:使目的基因在一个或多个系统中表达,然后用于蛋白质纯化、形成结晶、抗体的制备、DNA 结合化验等。

•   启动子交换:克隆目的基因到带有不同启动子的载体。

•   启动子分析:利用报告基因测试不同启动子的功能,例如:荧光素酶。

•   基因标签:表达不带标签或带有不同融合标签的目的基因,例如: 6XHis、Flag®、GFP 等;可用于免疫共沉淀或亚细胞      定位等。

 

EZShuttle™ 重组克隆体系原理

GeneCopoeia 提供的 EZShuttle™ 重组克隆体系应用 E.coli 和 λ 噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA 片段在载体间相互转换;其原理与 Gateway® 克隆技术相同(图1)。

 

 

    图 1. E.coli 和 λ 噬菌体位点间的重组机制。

 

备注: Gateway® 是 Life Technologies 的注册商标。

Recombinase™ BP Mix

GeneCopoeia 提供的 EZRecombinase™ BP Mix 可以使 DNA 片段高效、快速的在相兼容的载体间转换。EZRecombinase™ BP mix 催化含有 attB 位点的 DNA 片段与含有 attP 位点的载体进行重组反应,生成新的 EZShuttle™ 或 Gateway® Entry clone。

购买 货号 产品 描述 价格
ER003 EZRecombinase™ BP Mix(20 rxn) Catalyzes attB x attP cloning 2000.00
ER004 EZRecombinase™ BP Mix(100 rxn) 8725.00

 

  

 

产品优点

  •  高活性酶;
  •  与现有的 Gateway® 克隆技术完全兼容;

 

EZShuttle™ BP重组技术

EZRecombinase™ BP mix 包含 Int 和 IHF,催化含有 attB 位点的 DNA 片段与含有 attP 位点的载体进行体外重组反应,生成新的 EZShuttle™ 或 Gateway® Entry clone。

将 attB-PCR产物或 Expression clone 与 pShuttle™ 载体混合,然后加入 EZRecombinase™ BP mix,室温(25℃)反应 1 小时后用于转化 E.coli 感受态细胞(图2)。

 

图2. 一步法将含有 attB 位点的 DNA 片段转移到 pShuttle™ 载体或 Gateway® pDONR ™ 载体。

pShuttle™ vectors

pShuttle™ 载体

GeneCopoeia 提供的pShuttle™载体用于生成新的带有attL位点的EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭克隆或 Gateway® Entry clone。pShuttle-D01通过BP重组技术生成穿梭克隆;pShuttle-D02通过酶切-连接方法生成穿梭克隆;pShuttle-D03通过同源重组方法生成穿梭克隆,与本公司的Fast-Fusion™克隆试剂盒相匹配。

购买 货号 产品 描述 筛选标记 产品规格 价格
EG001 pShuttle-D01 pShuttle-D01 cloning vector for BxP recombination cloning (including attP1-ccdB-CmR-attP2) Kanamycin 10μg 2400
EG002 pShuttle-D02 pShuttle-D02 cloning vector for traditional restriction digestion ligation cloning (including attL1-MCS1-ccdB-CmR-MCS2-attL2) Kanamycin 10μg 2600
EG003 pShuttle-D03 pShuttle-D03 cloning vector for Fast-Fusion™ Cloning (including attL1-Homologous sequence-attL2) Kanamycin  1μg 2800

备注:pShuttle-D03载体的使用方法见Fast-Fusion™克隆试剂盒使用说明书。

 

 

Expression clones

即用型ORF表达克隆

GeneCopoeia提供人和小鼠即时表达的全长ORF克隆,OmicsLink™即用型 ORF表达克隆可以在体内体外即时表达,帮助客户更迅速地得到研究结果,更快地发表文章。

 

满足生物化学和细胞生物学科研的诸多需求

  • 可以在大肠杆菌、哺乳动物细胞和其他常见细胞中表达
  • 可以在无细胞体系中正确表达和翻译
  • 提供蛋白纯化和生产需要的
  • 有不同功能的蛋白标签供选择
  • 可制作原位杂交探针,用以检测组织或器官中基因的表达
  • 可用于shRNA和miRNA抑制基因的功能拯救实验

 

高通量筛选

高质量的表达克隆组合是大规模筛选的最佳选择,已被广泛地应用到功能基因组学,蛋白组学和系统生物学的前沿领域。

 

严格的质量控制体系

OmicsLink™ 即用型ORF表达克隆的源于经过严格筛选的人和小鼠全长基因,通过多个渠道比对、验证基因序列及注释信息,进行人工纠正,减少冗余、错误的序列。

OmicsLink™ 即用型ORF表达克隆是由全长cDNA克隆和高质量的人体组织cDNA文库作PCR模板构建的。

这些经过严格质量验证OmicsLink™ 即用型ORF表达克隆在投递前都经过严格的质量检测:

  • 所有的ORF经过全长测序
  • PCR扩增验证长度
  • 质粒通过了酶切验证

 

 

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ORF cDNA clones brochure

Read more – OmicsLink™ ORF cDNA brochure

订购

EZRecombinase™ BP Mix

购买 货号 产品 描述 价格
ER003 EZRecombinase™ BP Mix(20 rxn) Catalyzes attB x attP cloning 2000.00
ER004 EZRecombinase™ BP Mix(100 rxn) 8725.00

 

 

 

Expression clone (即用型ORF表达克隆)

GeneCopoeia提供40,000多种人和小鼠不同载体的即用型ORF表达克隆.

 

pShuttle™ 载体

购买 货号 产品 描述 筛选标记 产品规格 价格
EG001 pShuttle-D01 pShuttle-D01 cloning vector for BxP recombination cloning (including attP1-ccdB-CmR-attP2) Kanamycin 10μg 2400
EG002 pShuttle-D02 pShuttle-D02 cloning vector for traditional restriction digestion ligation cloning (including attL1-MCS1-ccdB-CmR-MCS2-attL2) Kanamycin 10μg 2600
EG003 pShuttle-D03 pShuttle-D03 cloning vector for Fast-Fusion™ Cloning (including attL1-Homologous sequence-attL2) Kanamycin  1μg 2800

 

 

 

Competent E. coli

购买 货号 产品 描述 价格(¥)
U0104A 2T1 感受态细胞 (10×100 µl) 高效感受态细胞 200
U0201A 一步法高效感受态细胞制备试剂盒 (2ml) 高效感受态细胞制备试剂盒 88
CC001 DH5α 感受态细胞 (10×100 µl) 高效感受态细胞 200
U0201B 一步法高效感受态细胞制备试剂盒 (20ml) 高效感受态细胞制备试剂盒 398
CC003 Stbl3 感受态细胞 (10×100 µl) 高效感受态细胞 1000

 

 

Download competent cells datasheet for more information.