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Luc-Pair™ miR Luciferase Assay

应用报告基因研究转录后调控是细胞生物学研究和药物发现领域的常用方法。早前,研究者着眼于研究转录水平的启动子调节的活性。但是,现在转录后水平的调控被认为是细胞中另外一种重要的调控方式,例如:小分子RNA的干扰作用。小分子RNA中的代表:siRNA和miRNA被证实其在细胞翻译后水平有着广泛的调控作用。

Catalog No. Name Size Price
LPFR-M010 Luc-Pair™ miR Luciferase Assay Kit (1) 1 96-well plate 询价
LPFR-M100 Luc-Pair™ miR Luciferase Assay Kit (10) 10 96-well plates 询价
荧光素酶基因是最广泛的基因表达功能研究中的报告基因,它具有如下优点:
萤火虫(Photinus pyralis)荧光素酶已被证实是检测启动子活性和监测基因转录后调控状态的理想的报告基因。它是在细胞质中作用的酶,分子量61kDa并催化下列反应:

以前,应用萤火虫荧光素酶检测遗传因子上调是比较容易的。但是由于检测量纲对基因的下调表达定量过于狭窄,而且例如细胞死亡等非特异因素能降低荧光素酶,它并不是很适合于研究基因表达的下调。因此,通过以单个参比报告基因为标准均一化实验中所用的报告基因就成为区分特异和非特异细胞应答效果 影响的有效方法。均一化方法同样是协调转染效率差异和细胞活力差异的有效方法。

用亮度计或荧光读取仪可以发现:发出荧光的光强和荧光素酶的数量成正比例关系。以前,应用萤火虫荧光素酶检测遗传因子上调是比较容易的。但是由于检测量纲对基因的下调表达定量过于狭窄,而且例如细胞死亡等非特异因素能降低荧光素酶,它并不是很适合于研究基因表达的下调。因此,通过以单个参比报告基因为标准均一化实验中所用的报告基因就成为区分特异和非特异细胞应答效果影响的有效方法。均一化方法同样是协调转染效率差异和细胞活力差异的有效方法。

萤火虫和海肾荧光素酶已经被广泛应用于协同报告并进行均一化研究。由于它们都是快速,容易和高灵敏的监测方法。而且萤火虫和海肾荧光素酶是理想的双基因报告系统,因为它们来源于不同的生物进化方向,蛋白结构和底物差异都很大,在实验中不会产生相互影响。

GeneCopoeia充分利用了萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶结构和底物的不同,优化并开发了方便的检测体系可以方便连续地定量测定两种荧光素酶的活性。两种酶酶活活性的检测可以依次在同一样品里检测出。萤火虫荧光素酶的荧光可以被一种试剂激发,并且第二种试剂可同时淬灭萤火虫荧光素酶的荧光和激发海肾荧光素酶酶的荧光。

GeneCopoeia Luc-Pair miR Luciferase Kit开发团队给该产品带来了几点优势和特点,可以增强产品的性能和增加产品的方便性。使用者可以充分感觉到以下几点优势:

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