产品目录

Genome-TALER™ 人类 AAVS1 Safe Harbor ORF 敲入克隆

Genome-TALER™ 人类 AAVS1 Safe Harbor ORF 敲入克隆是装载客户感兴趣的基因ORF的AAVS1供体克隆。该供体克隆可搭配Genome-TALER™ 人类 AAVS1 Safe Harbor 基因敲入试剂盒使用,将客户感兴趣的ORF特异敲入位于人类第19号染色体上的AAVS1位点。试剂盒中的TALEN组合靶向剪切AAVS1位点, 产生DNA双链断裂(DSBs),使该位点发生同源重组(HR)(图1)。目前这一系列敲入克隆有超过18,000条序列确证的人类OFR可供选择。

CRISPR20130724

图1: TALEN介导目标基因ORF敲入人类基因组AAVS1位点的原理图

 

pDonor-ORF-SH01-s

AAVS1_Left_TALEN-m

AAVS1_Right_TALEN-m

图2.人类 AAVS1 Safe Harbor ORF 敲入克隆及TALEN组合

 

(A)
sy_20111121223148224632
(B)

图6:以SOX2及OCT4为敲入基因的人类基因组safe harbor AAVS1 基因敲入实验。

(A)在六孔板上将OCT4(Cat#: DC-Z0092-SH01) 或SOX2(Cat#: DC-T2547-SH01) 供体质粒与AAVS1 TALEN组合共转染到HEK293T细胞。转染48小时后细胞传代,以嘌呤霉素(1µg/ml)筛选2周。转染48小时或筛选2周后用显微镜(Nikon Eclipse Ti ) 检查CopGFP的表达情况。只用供体质粒转染的对照组在嘌呤霉素筛选后只有少量细胞存活(数据未展示)。

(B)对AAVS1位点稳定整合SOX2(Cat#: DC-T2547-SH01) 或 OCT4 (Cat#: DC-Z0092-SH01) 的HEK293T细胞进行分析。同个印迹实验中,阴性对照(未经转染的HEK293T细胞)的内源SOX2或OCT4蛋白水平低至无法检出。

 

searchp

 

相关产品

Genome-TALER™ 人类 AAVS1 Safe Harbor 基因敲入试剂盒

Genome-TALER™ TALEN 与 TALE 定制服务

   Copyright© 2001-2015 广州复能基因有限公司 版权所有 粤ICP备10079716号