GeneCopoeia 为您提供 CRISPR sgRNA 文库,用于高通量敲除特定或者客户指定的人类基因族基因或通路基因。通过基因敲除实现的功能缺失型筛选是哺乳动物细胞系统基因分析、促进基因研究、基因组级别功能调查(如信号转导通路)以及药物研究(如靶标甄别和药物机制研究)的强大工具。 优势 |
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Genome-CRISP™ 人类 sgRNA 文库使用慢病毒载体,可通过两种不同方法(直接转染或包慢病毒颗粒后转导)实现大规模功能筛选。对于每个目的基因,我们会至少设计2个sgRNA 分别靶向基因的不同序列区(极少数基因由于序列限制只能设置1条 sgRNA)。这些 sgRNA 序列都经过设计优化及测序验证,确保高效的基因敲除。您可以选择订购分别针对不同基因家族的标准混合文库,或根据您的实验需要定制属于您的文库组合。文库目前提供慢病毒颗粒、转染级质粒 DNA 以及菌种等三种形式。它们能转染或转导多种细胞系,包括 Cas9 核酸酶稳定表达细胞系。 |
图 1. 使用 sgRNA 文库进行大规模筛选的示意图
应用
- 使用大量 sgRNA 分别或混合进行高通量基因敲除筛选。
- 药物靶标研究(图2)。
- 综合致死性筛选。
图 2. Genome-CRISP™ sgRNA 文库应用流程。 A:混合文库筛选。对感染了sgRNA混合文库的细胞株进行筛选,获取具备目的表型的阳性细胞株进行Sanger测序识别对应的sgRNA,或通过深度测序搜索比例过高或过低的sgRNA。B:使用 sgRNAs 文库array(独立克隆文库)进行基因敲除筛选。各板孔里的细胞株分别感染不同的sgRNA慢病毒颗粒,并筛选具备目的表型的阳性细胞株。如此无需测序即可获知与目的表型相关的sgRNA。
Genome-CRISP™ CRISPR 人类 sgRNA 文库克隆使用慢病毒载体,装载的 sgRNA 基因序列都经过测序验证。克隆本身并不携带 Cas9 核酸酶基因。您需要另外选购 Cas9 慢病毒表达克隆或能稳定表达 Cas9 的单克隆细胞系。如您需要进行慢病毒转导,我们推荐您使用后一种方法,选购 Cas9 稳定表达细胞系进行。
人类 sgRNA 文库
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- Genome-CRISP™ CRISPR 产品与服务
- Genome-TALER™ TALEN 及 TALE客户定制服务
- 稳定细胞系构建服务
- 预制 Cas9 稳定表达细胞系 (NEW)
- 慢病毒服务
- Safe harbor 基因敲入试剂盒及克隆
FAQ
技术说明Genome Editing: Applications For GeneCopoeia CRISPR sgRNA Libraries
用户手册参考文献
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