表达抑制效应已经过确证的人类激酶组shRNA表达克隆    

• 人类激酶组中的350个激酶基因已有相应的构建好的shRNA表达克隆，立即可得。
• 所有shRNAs均是19mer，具有高的表达抑制效应和低的脱靶效应。
• shRNA序列已克隆到哺乳动物细胞表达载体psi-sH1，sH1用于启动shRNA的表达效率高。 psi-sH1载体同时还包含由CMV启动表达的GFP-Rluc双报告融合基因，该跟踪标记基因可用于检测转染效率。
• 这些shRNA克隆的表达抑制效应已经过一套跟踪标记基因功能分析系统确证。具体为，首先构建包含有靶基因和一个跟踪标记基因AP的表达克隆piCheck-AP 。转录产生嵌合体mRNA，跟踪标记基因编码分泌型碱性磷酸酶（AP）。在没有shRNAs存在的情况下，AP基因稳定转录和翻译，靶基因的转录水平可通过AP酶活的检测测定（图A）；而共转染靶基因的shRNA克隆及对应的piCheck-AP-ORF克隆，shRNA识别靶基因位点，导致嵌合体mRNA被降解，靶基因与AP基因翻译均下降，基因表达抑制的效果就可通过AP色度法定量检测（图B）

• 人类激酶组shRNA表达克隆

产品保证

shRNA表达克隆的表达框已经全长测序，包括启动子、正义和反义靶序列、发夹结构、终止信号及其他接头序列。 对于构建到psi-sH1载体中的人类激酶组shRNA克隆，我们每个基因提供1~3个克隆，所有克隆均已通过AP色度法确证其对靶基因的表达抑制水平达到70％以上。对于构建到慢病毒和哺乳动物载体的shRNA克隆，我们每个基因提供4个克隆。我们保证至少有1个克隆达到在mRNA水平对靶基因的表达抑制水平达到70%以上，前提是用前面所提的检测方法，并严格按照说明书所提供的操作流程和注意事项进行实验。如果经过我公司核实，的确4个中没有1个有所期望的表达抑制水平的话，我公司承诺免费更换1-4个shRNA克隆。