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酵母双杂交表达克隆

高通量研究蛋白相互租用

GeneCopeia已经构建了40,000多种人和小鼠OmicsLink™ AD-ORF和BD-ORF 融合表达载体,可以在体内高通量研究蛋白之间的相互作用。 

  • 在酵母双杂交实验中,编码诱饵蛋白的基因克隆于OmicsLink™ pBD载体,可以表达带有GAL4 DNA结合域的融合蛋白。编码靶蛋白的基因克隆于 OmicsLink™ pAD载体,可以表达带有GAL4转录激活域的融合蛋白。
  • 将上述两种质粒共转染到酵母细胞中。如果诱饵蛋白和靶蛋白相互作用,GAL4 DNA结合域和转录激活域会结合,进而激活lacZ报告基因的表达。因此诱饵和靶蛋白的相互作用可以通过酵母细胞的表型确定。
 

 

ORF表达克隆有100多种载体、不同启动子以及标签可选。