miArrest™ miRNA抑制剂
miRNA抑制剂可以特异、高效地抑制生物体内源性miRNA的活性,是研究miRNA功能缺失的重要工具。GeneCopoeia提供慢病毒或非病毒载体的miArrest™ miRNA抑制剂表达克隆和化学合成的miRNA抑制剂。
miArrest™ miRNA抑制剂克隆可以特异性地结合目的miRNA,瞬时和稳定地抑制miRNA的功能,采用H1或者U6启动子驱动转录可以保证在大多数哺乳动物细胞中高水平表达。
HEK293细胞中共转染miR-125a 抑制剂表达质粒 (GeneCopoeia HmiR-AN0094-AM01) 、miR-125a 前体表达质粒(GeneCopoeia HmiR0309-MR03) 和miR-125a的靶标克隆质粒(GeneCopoeia HmiT019205-MT02:将LIN28 的3’UTR克隆到Gaussia荧光素酶-碱性磷酸酶双报告载体)。转染24小时后检测报告基因Gaussia 荧光素酶和参照基因碱性磷酸酶的活性。只转染Gluc-LIN28-3’-UTR质粒的细胞中Gaussia 荧光素酶与碱性磷酸酶活性比值设为1 (左数第一条柱),用来标准化其他细胞样品中的报告基因活性。结果表明miR-125a抑制了Gluc-LIN28-3’-UTR中Gluc 70%以上的活性(左数第二条柱)。这种抑制效应可被导入的不同剂量的miR-125a抑制剂表达质粒特异性的阻遏。转染100 ng 抑制剂表达质粒时,细胞内报告基因/参照基因活性比值(右数第一条)已超出单独转染Gluc-LIN28-3’-UTR报告质粒的对照组。这说明miR-125a抑制剂可以阻遏外源和内源性的miR-125a对靶标基因的抑制,提高GLuc-LIN28-3’-UTR转录本的翻译水平。
miRNA 抑制剂克隆导入细胞后表达的miRNA抑制剂(miArrest)特异地结合它们的靶miRNA。miRNA抑制剂转录后折叠形成一个稳定的陷阱结构,可以结合两分子靶miRNA。
miArrest™高效、特异地结合细胞内成熟的靶miRNA,阻止了miRNA对靶标mRNA的降解或者翻译抑制,上调miRNA靶标基因的表达。
独特的载体设计确保最大的特异性、抑制强度、抑制作用持久度和最低的脱靶效应。
慢病毒载体的miRNA抑制剂表达克隆
复能基因提供客户定制的慢病毒载体miRNA抑制剂表达克隆,周期2-5周。
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化学合成的miRNA抑制剂
需要优化设计的miRNA抑制剂。
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miRNA抑制剂表达克隆套装
复能基因除了提供单个克隆,也提供预制和定制的miRNA抑制剂表达克隆套装。
包括:Human whole genome miRNA inhibitor clone set (lentiviral)、Human cancer miRNA inhibitor clone sets (lentiviral)、Mouse genome miRNA inhibitor clone set (lentiviral)、Rat genome miRNA inhibitor clone set (lentiviral);以及人癌症miRNA抑制剂克隆套装 (慢病毒载体),癌症种类包括: bladder cancer、brain cancer、breast cancer、cervical cancer、cholangiocarcinoma、colorectal cancer、endometrial cancer、gastric cancer、head and neck cancer、hepatocellular carcinoma、kidney cancer、leukemia、lung cancer、lymphoma、melanoma、mesothelioma、myeloma、ovarian cancer、pancreatic cancer、pituitary adenoma、prostate cancer、sarcoma、thyroid carcinoma、uterine leiomyoma。
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