GeneHero™ sgRNA 文库
复能基因为您提供 CRISPR sgRNA 文库,用于高通量敲除特定或者客户指定的人类基因族基因或通路基因。通过基因敲除实现的功能缺失型筛选是哺乳动物细胞系统基因分析、促进基因研究、基因组级别功能调查(如信号转导通路)以及药物研究(如靶标甄别和药物机制研究)的强大工具。
产品优势
每个 sgRNA 文库克隆都是单独构建,经过测序验证后再混合,以保证文库的质量及对目的基因家族的 sgRNA 表现度。
可提供预制或定制 sgRNA 文库。
每个目的基因设计2条或更多 sgRNA。sgRNA克隆
多种产品规格可供选择,如慢病毒颗粒混合文库、转染级质粒DNA混合文库或菌种混合文库。
GeneHero™ 人类 sgRNA 文库使用慢病毒载体,可通过两种不同方法(直接转染或包慢病毒颗粒后转导)实现大规模功能筛选。对于每个目的基因,我们会至少设计2个sgRNA 分别靶向基因的不同序列区(极少数基因由于序列限制只能设置1条 sgRNA)。这些 sgRNA 序列都经过设计优化及测序验证,确保高效的基因敲除。您可以选择订购分别针对不同基因家族的标准混合文库,或根据您的实验需要定制属于您的文库组合。文库目前提供慢病毒颗粒、转染级质粒 DNA 以及菌种等三种形式。它们能转染或转导多种细胞系,包括 Cas9 核酸酶稳定表达细胞系。
图 1. 使用 sgRNA 文库进行大规模筛选的示意图
产品应用
使用大量 sgRNA 分别或混合进行高通量基因敲除筛选
药物靶标研究(图2)
表型筛选
综合致死性筛选
图 2. GeneHero™ sgRNA 文库应用流程。 A:混合文库筛选。对感染了sgRNA混合文库的细胞株进行筛选,获取具备目的表型的阳性细胞株进行Sanger测序识别对应的sgRNA,或通过深度测序搜索比例过高或过低的sgRNA。B:使用 sgRNAs 文库array(独立克隆文库)进行基因敲除筛选。各板孔里的细胞株分别感染不同的sgRNA慢病毒颗粒,并筛选具备目的表型的阳性细胞株。如此无需测序即可获知与目的表型相关的sgRNA。
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